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- 精液冷凍保存是將精液(yè)進行特殊處理,保存(cún)在超低溫下,以達(dá)到長期保存的目的。通常采用液(yè)氮(—196℃)和幹冰(—79℃)保存。其最大優點是可長期保存,使用(yòng)不受(shòu)時(shí)間、地域以及種用雄性動物壽命的(de)限製(zhì)。可充分提高公牛的利(lì)用率。現將冷凍精(jīng)液保存起來和怎樣進行(háng)解凍及給母牛輸精的有關(guān)技術操作介(jiè)紹如下(xià),供參考。
一、稀釋液(yè)的(de)配方:
12%的蔗糖液75毫升、甘油(yóu)5毫升、卵黃液20毫升。
二、稀釋方法:
將(jiāng)經過檢查合格的精液(活力0•6以上、精子密度中等)按1:2—5倍(bèi)稀釋液進行稀釋,其稀釋原則應保證每個(gè)顆粒精液中所含精子數不少(shǎo)於3000—4000萬個,解凍(dòng)後呈直線前進(jìn)運行的精子不(bú)少於1500萬個。
三、冷凍:
在裝有液氮的容器上置一銅紗網,距液氮麵2厘米(mǐ)左右,使溫度維持在—80℃至(zhì)—100℃。將平衡後的精液用滴管(guǎn)按一定量(0•1毫升)滴於銅紗網、滴完(wán)最後一(yī)滴停3—5分鍾後(hòu),當精液(yè)顆粒顏色變白時,立即浸入液氮,並將全部顆粒取下,收集於(yú)貯精(jīng)瓶或紗網布袋內,並做好標記,然後立(lì)即移入液氮罐中貯存。
四、解(jiě)凍:
將預先配製好的(de)2•9%檸檬酸的溶(róng)液1毫升,放入幹淨的小(xiǎo)試管中,再置於40℃左右的溫(wēn)水杯中,迅速取顆粒冷凍(dòng)精液1粒放入試管。輕(qīng)輕搖動至化凍(dòng)時,從水杯中取(qǔ)出試管,接著檢查精液(yè)活力(lì),不低於0•3即為合格(gé)品。
五、重視保精、快速解凍與鏡檢
1、根據(jù)液氮罐的性能要求,定期添加液氮罐內盛裝凍精的提筒不能露在液氮麵外。
2、取精時,盡可能用長鑷(niè)子,切勿將提筒或(huò)紗布袋(dài)提到臨界線(xiàn)以上處(罐頂10厘米左右)。
3、從液氮中取出細管凍精時,要(yào)輕輕甩1—2下,將塑(sù)料細管的棉塞端放入35—40℃的溫水中,把封口端留在水外1—1•3厘米外,待管內(nèi)精液融化一半時,立即取出備用。
4、解凍後的精液鏡檢時,精子的活力不低於0•3方可用於輸精,才能確(què)保正常受(shòu)精。
5、解凍後的精液應立即輸配,不宜停放時間過長,應做到現解凍、現輸(shū)精。
六、適(shì)時輸精
母牛正常排卵是在發情結束後6—12小時,精子在(zài)母牛生殖道的存活時間為(wéi)12—20小時,且還需要4—6小時(shí)的獲能過程,才能與卵(luǎn)子結合受精。精子15分鍾就會到達輸卵管受精部位,因此,讓精子早於卵子(zǐ)到達輸卵管受精部位是提高受胎率的先(xiān)決條件。
1、適宜(yí)的輸精時間:是在母牛的發情後期。此時母牛表(biǎo)現:精神平穩,外(wài)陰部腫脹消失,陰道不再(zài)流出透明液體。直腸檢查卵泡脹大,表麵緊張,有一觸(chù)即(jí)破之感。此時(shí)為(wéi)最佳輸精時機。
2、適宜的(de)輸精部位:是在子宮頸(jǐng)內口1厘米處即子宮體基部,過(guò)淺易導致精液(yè)外流,過深易損傷子宮(gōng)內粘膜。
3、適宜的輸精方法:直腸把握子宮頸輸精法。將(jiāng)母牛保定,左手插入母牛直腸輕輕握住子宮頸後端,右手將輸精(jīng)器自陰門向斜上(shàng)方緩慢插入5—10厘米(以避開(kāi)尿道口)再改為平插送到子宮(gōng)頸口,緩慢越過子宮頸管中的皺壁,到達子宮頸基部,徐徐注入精液後,緩緩抽出輸精器。
4、適宜(yí)的輸(shū)精次數:以1—2次為宜。可在發情母牛發情高潮後,黃牛在發情高潮後6—12小時,水牛在發情高潮後18—20小時進行第(dì)一次輸精,前後間隔8—12小時再進行第二次輸精。精液冷凍保存是將精液進(jìn)行特殊處(chù)理,保存在超低溫下(xià),以達到長期保存的目的。通常采用液氮(—196℃)和幹(gàn)冰(—79℃)保存。其最大優點是可長期保存,使用不受時(shí)間、地域以及種(zhǒng)用雄性動物壽命的限製。可充(chōng)分提高公牛的利用率。現將(jiāng)冷凍精液保存起來和怎樣進行解(jiě)凍及給母牛輸精的有關技術操作介紹如下,供參考。
一(yī)、稀釋液的配方:
12%的(de)蔗糖液75毫升、甘油(yóu)5毫升(shēng)、卵(luǎn)黃液20毫升。
二、稀釋(shì)方法:
將經過檢查合格的精液(活力(lì)0•6以(yǐ)上、精子密(mì)度中等)按1:2—5倍稀釋液進行(háng)稀釋,其稀(xī)釋原(yuán)則應保證每個(gè)顆粒精液中所含精子數(shù)不少於3000—4000萬個,解凍後呈直線前進運(yùn)行(háng)的精子不少於1500萬個(gè)。
三、冷凍(dòng):
在裝有液氮的容器上置一銅紗網,距液氮麵2厘米左右,使溫度維持在—80℃至—100℃。將平衡後(hòu)的(de)精液用滴管按一定量(liàng)(0•1毫升)滴於銅紗網、滴完最後(hòu)一滴停3—5分鍾後,當精液顆(kē)粒顏色(sè)變白時,立即浸入(rù)液氮,並將全(quán)部顆粒取下,收集於貯精瓶或紗網布袋內,並做(zuò)好標記,然後立即移入液氮罐(guàn)中貯存。
四、解凍:
將預先配製好的2•9%檸檬酸的溶液1毫升(shēng),放(fàng)入幹淨的小試管中,再置於40℃左右的溫水(shuǐ)杯中,迅速(sù)取顆粒冷凍精液1粒放入試(shì)管。輕輕搖動至化凍時,從(cóng)水杯中取出試(shì)管,接著檢查精液活力,不低於0•3即(jí)為合格品。
五、重視保精、快速解(jiě)凍與鏡檢
1、根據液氮罐的性能要(yào)求,定期添加液氮罐內盛(shèng)裝凍精的提筒不能露在(zài)液氮麵外。
2、取精時,盡可能用長鑷子(zǐ),切勿(wù)將提筒或紗布袋提到臨界線以上處(罐(guàn)頂10厘米左右)。
3、從液(yè)氮中取出細管凍精(jīng)時(shí),要輕輕甩(shuǎi)1—2下,將塑料細管的棉塞端放入35—40℃的溫水中,把封口端(duān)留在水(shuǐ)外1—1•3厘米外,待管內精液融化(huà)一半時,立即取出備用。
4、解凍後的精液鏡檢時,精子的活力不低於0•3方可用(yòng)於輸精,才能確保正常受精。
5、解(jiě)凍(dòng)後的精液應立即(jí)輸配,不宜停放時間過長,應做到現解凍、現輸(shū)精。
六、適時輸精(jīng)
母牛正(zhèng)常排卵是在發情結束後6—12小時,精子(zǐ)在母牛生殖道的存活時間為12—20小時(shí),且(qiě)還需要4—6小時的獲能過程,才能與卵子結合受精。精子(zǐ)15分鍾就會到達(dá)輸卵管受精部位,因此,讓精子早於卵子到達輸卵管受精部位是提高受胎率的先決條件。
1、適宜的輸精時間:是在母(mǔ)牛的發情後期。此(cǐ)時母牛表(biǎo)現:精神平穩,外陰部(bù)腫脹(zhàng)消失,陰道不再(zài)流出透明液體。直腸檢查卵泡脹大,表麵緊張,有一觸即破(pò)之感。此時為最佳輸精時機。
2、適宜的(de)輸精(jīng)部位:是在子宮頸內口1厘米處(chù)即子宮體基部,過淺易導致精液外流,過深易損傷子宮內粘膜。
3、適宜的輸精方法:直腸把(bǎ)握子宮頸輸精法。將母牛保定,左手插入母牛直腸輕輕握住子宮頸後端,右手將輸(shū)精器自陰門向斜上方緩慢插入5—10厘(lí)米(mǐ)(以避開尿道口)再改為(wéi)平插送到子宮頸口,緩慢越過子宮頸管中的皺(zhòu)壁,到達子宮頸基部,徐徐注入(rù)精液後,緩(huǎn)緩(huǎn)抽出輸精器。
4、適宜的輸精次數:以1—2次為宜。可在發情母牛發情高(gāo)潮後,黃牛在發(fā)情(qíng)高潮後6—12小時,水牛在發情高潮後18—20小時進行第(dì)一次輸精,前後間隔8—12小時再進行第二次輸精。
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